C18 mi C8 mi? Küçük Bir Fark, Büyük Bir Analitik Etki

HPLC (High Performance Liquid Chromatography) kolon seçimi analiz sonucunun kalitesini ve süresini ciddi biçimde etkiler.
Özellikle C18 (ODS) ve C8 kolonları, ters faz (reverse phase) HPLC’nin en sık kullanılan iki kolon tipidir.
Aralarındaki farkı ve hangisini ne zaman tercih etmeniz gerektiğini detaylıca açıklayayım 👇

🔹 1. Temel Fark: Karbon Zinciri Uzunluğu

Kolon tipi	Bağlı grup	Karbon sayısı	Hidrofobiklik (su iticilik)
C18	Oktadesilsilan (–C18H37)	18	Yüksek
C8	Oktanilsilan (–C8H17)	8	Orta

👉 Yani C18 kolonu daha hidrofobik, C8 kolonu daha az hidrofobiktir.

🔹 2. Retansiyon (Tutmada) Farklar

C18 kolonu:
- Analitler kolonda daha uzun süre kalır.
- Hidrofobik (apolar) bileşikler için daha güçlü etkileşim olur.
- Analiz süresi uzar, ancak ayrım (rezolüsyon) daha iyi olabilir.
C8 kolonu:
- Tutunma daha zayıftır, bileşikler daha erken elüe olur.
- Hidrofobik etkileşimler daha azdır.
- Analiz süresi kısalır, ancak çok benzer bileşikleri ayırmak zorlaşabilir.

🔹 3. Hangi Durumda Hangisini Tercih Etmeli?

Durum	Tercih edilen kolon	Gerekçe
Küçük, polar bileşikler (örneğin aminler, organik asitler)	C18	Daha uzun zincir, polar bileşikleri daha iyi ayırır.
Orta derecede apolar bileşikler (örneğin kısa zincirli alkoller, steroidler)	C8	Fazla uzun tutma istenmez.
Karışım çok hidrofobikse	C8	C18 kolonda çok uzun tutma olur, analiz süresi uzar.
Analiz süresini kısaltmak istiyorsan	C8	Daha hızlı elüsyon.
Yüksek rezolüsyon istiyorsan	C18	Daha güçlü tutma, daha iyi ayrım.
Su oranı yüksek mobil faz kullanılıyorsa	C8	C18 fazı çökebilir (phase collapse).

🔹 4. Örnekler

Analit	Kolon	Not
Kafein, paracetamol gibi orta polar ilaçlar	C18	Standart farmasötik analizler için klasik kolon
Yağ asitleri, lipitler	C8	C18’de fazla uzun kalabilirler
Amino asit türevleri	C18	Polar ve orta apolar arasında uygun tutma
Küçük organik asitler	C18	Daha uzun tutma ve daha iyi ayırım

🔹 5. Pratik İpucu

C18 kolonunla başla; eğer: